실시간 PCR(Real-Time PCR) 마스터믹스는 실시간 중합효소연쇄반응(PCR)의 각 반응을 간단하고 편리하게 진행할 수 있도록 모든 필요한 성분들을 미리 혼합한 것입니다. 기본적으로 실시간 PCR은 DNA의 특정 부위를 선택적으로 복제하고 이 과정에서 발생하는 DNA의 양을 실시간으로 측정하는 기술입니다.
실시간 PCR 마스터믹스의 작용 원리는 다음과 같습니다:
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DNA 복제의 기본 요소 제공: 마스터믹스에는 DNA 복제에 필요한 DNA 중합효소, dNTPs(뉴클레오타이드), 버퍼, 그리고 때때로 활성화를 돕는 마그네슘 이온 같은 요소들이 포함되어 있습니다. 또한, 특정 DNA 영역의 증폭을 위해 필요한 프라이머도 이 혼합물에 추가되어야 합니다.
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형광 염료 또는 형광 프로브를 이용한 실시간 탐지: 마스터믹스에는 SYBR Green 같은 형광 염료나 TaqMan 프로브와 같은 특정 형광 프로브가 포함될 수 있습니다. 이들은 PCR 반응 도중 생성되는 DNA의 양을 실시간으로 탐지하고 측정하는 데 사용됩니다. DNA 양이 증가함에 따라 형광 신호도 증가하여 PCR 기계가 이를 감지하고 기록합니다.
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열 사이클: 마스터믹스가 준비된 후, PCR 반응은 DNA를 고열로 불안정하게 만들어 두 개의 가닥으로 분리하는 변성 단계로 시작합니다. 그 후, 낮은 온도에서 프라이머가 특정 DNA 서열에 결합하는 어닐링 단계가 진행됩니다. 마지막으로, DNA 중합효소는 새로운 DNA 가닥을 합성하는 연장 또는 신장 단계에서 활성화됩니다. 이 세 단계는 목표 DNA 영역이 충분히 증폭될 때까지 여러 번 반복됩니다.
실시간 PCR 마스터믹스의 사용은 기존 PCR 프로토콜을 간소화하고 실험의 일관성을 향상시키는 데 도움이 됩니다. 사용자는 단순히 샘플 DNA와 특정 프라이머를 마스터믹스에 추가하기만 하면 되기 때문에 PCR 준비 과정이 훨씬 더 간편해집니다.
(취미)
(스압)소장하고 있는 책 일부2
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